<xmp id="y2ogc"></xmp>
  • 扫码关注公众号           扫码咨询技术支持
    客服热线:400-901-9800  客服QQ:4009019800  技术答疑  技术支持  质量反馈  人才招聘  关于我们  联系我们
    【赏文】恭喜浙江大学医学院蔡志坚课题组发表文章于《Journal of Extracellular Vesicles》-北京博奥森生物技术有限公司
    首页 > 新闻动态 > 正文
    【赏文】恭喜浙江大学医学院蔡志坚课题组发表文章于《Journal of Extracellular Vesicles》
    发表者:北京博奥森生物      发表时间:2021-11-25

    文章信息



    文章名称:Neddylation of Coro1a determines the fate of multivesicular bodies and biogenesis of extracellular vesicles.

    发表期刊:J Extracell Vesicles. 2021 Oct;10(12):e12153.

    影响因子 (IF) 25.841

    本文应用 Bioss 产品

    Rabbit anti-Rab7 Cat: bs-6703R

    文中检测种属: Human;应用: Cryo-EM

    图片来自原文FIGURE 6. (e)


    Rabbit anti-UBE2F Cat: bs-8378R 

    文中检测种属Human,Mouse;应用WB


    图片来自原文FIGURE 4.(a) 




    研究背景

    胞外囊泡 (EVs) 根据其大小和来源主要分为两类:微囊泡和外泌体。微囊泡是从质膜向外出芽脱落,形成直径在 50nm ~ 1μm 之间的微囊泡、微粒和大囊泡。外泌体是由内体途径产生的直径在 30nm ~ 150nm的小的囊泡,作为细胞之间独特的传递载体,参与多种疾病的过程,包括发育,免疫,组织稳态,肿瘤和神经退行性疾病等。因此,深入探究以外泌体为代表的胞外囊泡的生物发生的调控机制是治疗这些疾病的潜在策略,同时也对于其作为诊断标记物和治疗性药物载体有着重要的临床意义。在 EV 的亚群外泌体的生物合成过程中,多囊泡体 (MVBs) 或者与溶酶体融合而降解,或者与质膜融合释放管腔内囊泡形成外泌体,MVBs 的命运直接决定了外泌体的生物发生。然而,MVBs 如何靶向至溶酶体以及质膜融合的机制仍有待深入研究。蛋白质的翻译后修饰在 EV 的生物发生中起重要的调节作用。Neddylation 作为类泛素化修饰的一种,尚无明确的研究证实其是否可以参与调节 EV 的生物发生。



    研究原理

    为探究Neddylation是否参与调节 EV 的生物发生,首先我们使用Neddylation 特异性抑制剂 MLN4924  探究 Neddylation 对EV 分泌的影响。接着,我们从调节 EV 生成的三个方面:MVBs 的早期形成、MVBs 靶向溶酶体降解、MVBs 与质膜的融合分别探究 Neddylation 在调控 EV 分泌中的作用,最终证实 Neddylation 通过靶向 MVBs 至溶酶体降解来抑制 EV 的生成。我们进而通过质谱分析找到在调控 EV 分泌过程中 Neddylation 修饰的底物蛋白 Coro1a,并证实了 Coro1a 在生理条件下可以发生 Neddylation 修饰,以及Coro1a 是 Neddylation 调控 EV 分泌过程所依赖的。随后我们明确了 Coro1a 发生 Neddylation 修饰的机制和主要修饰位点。之后,我们进一步探讨 Neddylation 修饰的 Coro1a 在 EV 生成中的作用以及其是否可以用作调节 EV 分泌的靶标,从而提示我们通过 Coro1a 介导的EV分泌调节来调控肿瘤的发展。


    研究结果

    我们首先发现 Neddylation 通过促进 MVBs 的靶向溶酶体降解从而抑制 EV 的分泌。进而,我们鉴定出 Neddylation 的新底物 Coro1a,以及与 Coro1a 的 Neddylation 修饰过程中相关的 E2 结合酶 UBE2F 和 E3 连接酶 TRIM4。在 TRIM4 的催化下,NEDD8 主要与 Coro1a 的第 233 位赖氨酸残基结合形成共价键。而后, Neddylation 修饰的 Coro1a (NEDD8-Coro1a) 与 Rab7 直接相互作用并将 Rab7 招募至 MVBs,从而促进 MVBs 的溶酶体降解,进而导致 MVBs 与质膜的融合减少和 EV 分泌降低。此外,通过体内肿瘤模型,我们证实 Coro1a 是通过减少 EV 分泌来抑制肿瘤进展的有效靶标。


    NEDD8-Coro1a mediates the recruitment of Rab7 to MVBs

    Inhibition of neddylated Coro1a-mediated increased EV secretion promoting tumour development progression


    研究结论

    我们的研究证实,Neddylation 在 EV 的生物发生中起着负调作用。同时,我们鉴定出 Neddylation 的新底物 Coro1a,明确了 Neddylation 修饰 Coro1a 招募 Rab7 促使 MVBs 靶向溶酶体融合从而调控EV的生成,从而揭示了调节 EV 生物发生的新机制,为调控 EV 生成和肿瘤治疗提供新的靶点。


    文章内使用的抗体—Bioss相关推荐

     二抗

    英文名称

    裸抗货号

    文献数量

    标记二抗

    Goat Anti-Rabbit IgG H&L

    bs-0295G

    90

    HRP Cy3 Cy5 AP PE  FITC AF488 AF594 AF647 GOLD Biotin

    Goat Anti-Mouse IgG H&L

    bs-0296G

    44

    HRP Cy3 Cy5 AP PE  FITC AF488 AF594 AF647 GOLD Biotin

    Donkey Anti-Rabbit IgG H&L

    bs-0295D

    3

    HRP Cy3 Cy5 AP PE  FITC AF488 AF594 AF647 GOLD Biotin


     一

    产品名称

    货号

    交叉反应

    应用

    PubMed

    Rabbit anti-Rab7 (Cryo-EM)

    bs-6703R

    Mo Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    5

    Rabbit anti-UBE2F

    bs-8378R

    -
    -

    -

    beta-Actin (Loading Control)

    bs-0061R

    Mo Hu Rt

    WB, IHC, FC, ICC

    769

    beta-Actin (Loading Control)

    bsm-33036M

    Hu

    WB

    55

    Ki-67

    bs-10837R

    Hu

    FC

    -

    Ki-67

    bs-2130R

    Mo Hu

    IHC, FC, IF, ICC

    62

    Ki-67

    bs-23101R

    Hu

    IHC, FC, IF, ICC

    -

    Ki-67

    bs-23102R

    Mo Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    3

    Ki-67

    bs-23103R

    Mo Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    15

    Ki-67

    bs-23104R

    Mo Hu

    IHC, FC, IF, ICC

    2

    Ki-67

    bs-23105R

    Hu

    IHC, FC, IF, ICC

    3

    Ki-67

    bsm-33070M

    Hu Rt

    IHC, IF, ICC

    5

    Ki-67

    bsm-51754M

    Hu

    IHC, IF, ICC

    -

    CD8

    bs-0648R

    Mo Hu

    WB, IHC, IF, ICC

    50

    CD8

    bs-10699R

    Mo Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    2

    CD8

    bs-22849R

    Hu

    WB

    -

    CD8

    bs-22852R

    Rt

    WB

    -

    CD8

    bs-23447R

    Mo

    WB

    -

    CD8

    bs-23448R

    Mo

    WB

    -

    CD8

    bs-4790R

    Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    3

    CD8 alpha

    bs-4791R

    Rt

    WB

    4

    C-Myc

    bs-24507R

    Hu

    WB

    -

    C-Myc

    bs-4963R

    Hu

    IHC, IF, ICC

    17

    c-MYC

    bsm-51652M

    Hu

    WB

    -

    Myc tag

    bs-0842R

    Hu

    WB, IHC, IF, ICC

    1

    Myc tag

    bs-23166R

    Fusion Protein

    WB

    -

    Myc tag

    bsm-33024M

    Recombinant protein

    WB

    -

    n-Myc

    bs-22205R

    Mo

    WB

    -

    n-Myc

    bs-5980R

    Hu

    IHC, IF, ICC

    3

    CD45

    bs-0522R

    Hu Rabbit

    FC

    14

    CD45

    bs-10599R

    Mo Rt

    FC

    -

    CD45

    bs-10602R

    Rt

    FC

    -

    CD45

    bs-4819R

    Hu Rt

    WB, FC

    6

    CD45

    bs-4820R

    Hu

    FC

    1

    CD45

    bs-7210R

    Hu

    FC

    -

    CD45

    bsm-30095M

    Hu

    FC

    -

    CD45

    bsm-33052M

    Hu

    WB

    -

    His tag

    bs-0287R

    Recombinant protein

    WB

    14

    His Tag

    bs-10582R

    Recombinant protein

    WB

    -

    His tag

    bsm-33004M

    Recombinant protein

    WB

    -

    LAMP1

    bs-1970R

    Hu Rt

    IHC, FC, IF, ICC

    11

    CD9

    bs-22293R

    Mo

    WB

    -

    CD9

    bs-23035R

    Mo

    IHC, IF, ICC

    1

    CD9

    bs-2489R

    Mo Hu Rt

    WB, FC

    9

    CD9

    bsm-52264R

    Mo Hu

    WB, IHC, IF, ICC

    -

    CD63

    bs-1523R

    Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    8

    CD63

    bs-23032R

    Mo

    IHC, IF, ICC

    1

    TSG101

    bs-1365R

    Hu Rt

    WB, IHC, IF, ICC

    6

    TSG101

    bsm-51699M

    Hu

    WB

    -

    TSG101

    bsm-52746R

    Mo Hu Rt

    IHC, IF, ICC

    -

    CD81

    bs-6934R

    Mo Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    6

    CD16

    bs-6028R

    Mo Hu Rt

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    5

    CD16

    bsm-33096M

    Mo

    WB

    -

    CD32

    bs-2573R

    Hu

    WB, FC

    -

    CD32

    bs-4991R

    Hu

    WB

    1

    PD-1

    bs-1867R

    Mo Hu Rt

    WB, FC

    5

    Granzyme A

    bs-2578R

    Mo

    IHC, IF, ICC

    -

    Granzyme B

    bs-1351R

    Hu

    IHC, FC, IF, ICC

    3

    Granzyme K

    bs-6788R

    Mo

    WB

    -

    Annexin A1

    bs-1562R

    Hu Rt

    WB, IHC, IF, ICC

    2

    TIM 3

    bs-8766R

    Mo Rt

    WB, IHC, IF, ICC

    2

    Ubiquitin

    bs-1549R

    Mo Hu Rt

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    1

    Ubiquitin

    bs-7944R

    Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    1

    Ubiquitin

    bsm-33296M

    Mo

    IHC, IF, ICC

    -

    Ubiquitin

    bsm-33307M

    Mo Hu Rt

    IHC, IF, ICC

    -

    Ubiquitin

    bsm-33443M

    Mo

    IHC, IF, ICC

    -

    Cullin 1

    bs-4208R

    Hu

    IHC, IF, ICC

    -

    Cullin 3

    bs-4211R

    Hu

    WB

    1

    CORO2B

    bs-13997R

    Mo Hu

    IHC, IF, ICC

    -

    CORO6

    bs-13998R

    Mo

    WB

    -

    CORO7

    bs-13999R

    Hu

    IHC, IF, ICC

    -

    Coronin 3

    bs-6799R

    Mo

    IHC, IF, ICC

    -

    ALIX

    bs-6767R

    Mo Hu Rt

    WB, IHC, IF, ICC

    1

    Flag Tag

    bs-0965R

    Recombinant protein

    WB

    1

    Flag Tag

    bsm-33346M

    Recombinant protein

    WB

    -

    HA tag

    bs-0966R

    Recombinant protein

    WB

    -

    EEA1

    bs-11250R

    Hu

    IHC, IF, ICC

    -

    HGS

    bs-15473R

    Rt

    IHC, IF, ICC

    -

    GM130

    bs-8155R

    Rt

    IHC, IF, ICC

    -

    MON1A

    bs-17711R

    Hu

    WB

    -

    MON1B/HSRG1

    bs-17712R

    Mo

    IHC, IF, ICC

    -

    RAB7

    bs-6703R

    Mo Hu

    WB, IHC, FC, IF, ICC

    -

    产品信息以官网为准

    版权所有 2019-2022 www.iheartsfbands.com 北京博奥森生物技术有限公司
    通过国际质量管理体系ISO9001:2008 GB/T19001-2008认证    编号:00115Q211807R1M/1100
    京ICP备05066980号-1         京公网安备110107000727号